工藝優(yōu)化中的雜質(zhì)研究思路

　　分析方法的建立

　　分析方法是對于工藝開發(fā)的全過程都是基礎，尤其在雜質(zhì)研究的過程中更是起到“眼睛”和“標尺”的作用，所以開發(fā)穩(wěn)定、可靠、精確的分析方法就是關(guān)鍵中的關(guān)鍵。一般常用到的色譜法有TLC、HPLC、GC等等，其中使用頻率最高的是HPLC，那么下面就以HPLC為例進行說明。主要分為以下幾個方面：

　　為了能開發(fā)出準確的分析方法供雜質(zhì)研究使用，工藝人員最好能提供反應液、粗品、結(jié)晶母液等雜質(zhì)含量高、雜質(zhì)數(shù)量多的樣品作為供試品，雜質(zhì)研究中最好使用二極管陣列檢測器。

　　反應機理分析

　　結(jié)合文獻、藥典、專利等信息，對每一步反應的反應機理進行分析，推測可能的副反應和可能產(chǎn)生的雜質(zhì)，初步推測反應的關(guān)鍵參數(shù)及在參數(shù)的變化下會引起的雜質(zhì)變化。例如反應：

　　分析機理為：

　　這樣很明顯可以看出B在其中起到的是催化劑的作用，過程中會生成哪些雜質(zhì)、需要研究哪些雜質(zhì)就一目了然，接下來只是需要通過實驗進行證實和確認需要進行主要研究的雜質(zhì)。

　　關(guān)鍵參數(shù)對雜質(zhì)的影響

　　之所以稱之為關(guān)鍵參數(shù)，是因為這些參數(shù)超出范圍的變化不僅會引起單獨步驟雜質(zhì)體系的改變，更重要的是會影響API雜質(zhì)譜的變化，從而改變產(chǎn)品質(zhì)量。一般來講影響最大的因素有：溫度、溶劑類型、物料配比、pH值等。

　　溫度：溫度對于副產(chǎn)物的生成在一般反應中是影響較大的?？梢酝ㄟ^文獻或者專利獲得中間反應溫度的數(shù)據(jù)，分別在設置低溫和高溫兩個溫度，每個溫度之間最好有25度的溫差范圍，這樣能更加全面的判斷溫度的變化對雜質(zhì)譜帶來的影響。

　　溶劑：一方面反應對溶劑極性的依賴性會對反應中雜質(zhì)的變化帶來影響；另一方面，溶劑本身就是雜質(zhì)的一部分，因此盡量選擇限度較寬的二、三類溶劑進行反應。一定避免選擇向石油醚這樣的混合溶劑，否則會給溶劑殘留限度的制定帶來很大的麻煩。

　　物料配比：同樣也可以設計三個范圍較寬的不同比例，結(jié)合加料方式來考察此參數(shù)對反應雜質(zhì)變化的影響。

　　pH值：反應受體系酸堿性影響大，也應該考察在酸、中、堿性條件下的反應情況考察雜質(zhì)的變化。

　　雜質(zhì)制備

　　在確定了雜質(zhì)之后，就需要得到雜質(zhì)對反應的雜質(zhì)限度進行確定，因此雜質(zhì)的制備就是必不可少的，雜質(zhì)制備的方式如下：

　　1、利用與主反應相同的反應，通過不同起始物料制備所需雜質(zhì)。此種雜質(zhì)多為起始物料中雜質(zhì)通過與主反應相同反應生成的雜質(zhì)；

　　2、通過改變反應條件制備目標雜質(zhì)。此種雜質(zhì)多為參數(shù)超范圍引起的副反應生成的雜質(zhì)；

　　3、制備液相制備目標雜質(zhì)。多可通過母液富集，之后再通過制備液相進行分離獲得；

　　4、定向合成目標雜質(zhì)。通過重新設計的合成路線制備目標雜質(zhì)，此種雜質(zhì)一般在體系中難以祛除，容易超限度，并且副反應生成量也較少；

　　5、當然不可以少了最直接獲得雜質(zhì)的途徑，那就是購買。

　　雜質(zhì)鑒定

　　初步的雜質(zhì)確認可以按照遞進法進行確認。首先研究起始物料中的雜質(zhì)情況，這就需要起始物料供應商提供簡要的合成路線及生產(chǎn)工藝；反應中間體要選擇那些雜質(zhì)個數(shù)多、含量較高的樣品去檢查，前文提到這些樣品有反應液、粗品等；獲得的中間體不要經(jīng)過純化，直接進行下面的反應，考察已有雜質(zhì)的變化和新雜質(zhì)的生成情況。通過LC-MS和GC-MS等手段對雜質(zhì)進行初步的鑒定，在制備獲得目標雜質(zhì)后，通過核磁及質(zhì)譜對其進行最終的結(jié)構(gòu)鑒定。