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血管緊張素轉(zhuǎn)化酶概述
ACE可催化血管緊張素Ⅰ(十肽)水解成八肽的血管緊張素Ⅱ,使血管進(jìn)一步收縮,血壓升高。也可作用于腎上腺皮質(zhì),促進(jìn)醛固酮的分泌。因此,ACE是腎素-血管緊張素-醛固酮的重要成分。ACE還催化具有降壓作用的緩激肽水解而失去活性。ACE廣泛分布于人體各組織,以附睪、睪丸及肺的含量較豐富,其中肺毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞ACE活性最高。
血管緊張素轉(zhuǎn)化酶正常值
1、三硝基苯磺酸鈉(INBS)顯色法26.1~56.7kU/L。
2、酶偶聯(lián)法289±83U/L。
血管緊張素轉(zhuǎn)化酶臨床意義
血清ACE測(cè)定主要同于肺部疾病的診斷,對(duì)其他系統(tǒng)疾病的診療也有一定價(jià)值。
1、肺部疾病
絕大多數(shù)結(jié)節(jié)病患者血清ACE活力升高,其陽(yáng)性率及幅度與病情活動(dòng)與否和病變累及的范圍有關(guān)。肺結(jié)核也可升高,而哮喘發(fā)作、急性心原性肺水腫、慢性阻塞性肺疾患、自發(fā)性氣胸、肺纖維化、成人呼吸窘迫綜合征等血清ACE均有不同程度下降。
2、肝臟疾病
多數(shù)肝臟病患者ACE活性升高,升高幅度依次為肝硬化、急性肝炎、慢性肝炎。脂肪肝則正常。
3、甲狀腺疾病
甲亢患者ACE活性明顯高于其他甲狀腺疾病,且酶活力高低與T3、T4含量呈正相關(guān)。
4、其他
糖尿病、虹膜炎、免疫母細(xì)胞肉瘤等,血清ACE升高;高血壓、結(jié)腸炎等則降低。
血管緊張素轉(zhuǎn)化酶檢查方法
1、三硝基苯磺酸鈉(INBS)顯色法:取試管2支,標(biāo)明空白管(B)和測(cè)定管(U),各加血清0.01ml,B管加試劑(1)、(3)、(4),U管加底物0.1ml,置37℃水浴30min;U管加試劑(3)、(4)各0.1ml,然后B、U管各加蒸餾水1.0ml,混勻;1500g離心10min,各取上清液0.75ml,分別加入試劑(2)1.0ml及TNBS 0.05ml,室溫30min或37℃ 15min,用5mm比色杯,在420nm處,B管調(diào)零,讀取U管吸光度。
2、酶偶聯(lián)法:取小試管4支,分別標(biāo)明測(cè)定管(U),標(biāo)準(zhǔn)管(S),血清空白管(SB),試劑空白管(RB)。
混勻,以雙蒸餾水調(diào)零點(diǎn),410nm波長(zhǎng)比色,記錄各管2min吸光度△A值。
血管緊張素轉(zhuǎn)化酶注意事項(xiàng)
1、三硝基苯磺酸鈉(INBS)顯色法:
(1)標(biāo)本在室溫或冰箱存放1周,酶活力無(wú)明顯變化,-15℃保存3周酶活性穩(wěn)定。
(2)膽紅素對(duì)ACE有明顯抑制作用,故重度黃疸可使測(cè)定結(jié)果偏低。EDTA是ACE的強(qiáng)抑制劑,NaCl和Na2SO4對(duì)ACE有明顯的活化作用,溶血、脂血對(duì)結(jié)果無(wú)影響。
(3)本法與紫外分光光度法酶活力單位一致,但其測(cè)得值為紫外法的9倍。
2、酶偶聯(lián)法:
(1)當(dāng)?shù)孜飌H 8.0,GGCN 1.0mmol/L,GGT6.7ku/L時(shí),ACE活性與吸光度值有良好線性。線性范圍大,即使ACE在1500U/L,不用稀釋也可獲得理想結(jié)果。
(2)GGCN濃度選擇:本反應(yīng)體系中GGCN既是測(cè)定酶ACE的受體,又是指示酶GGT的供體。以1.0mmol/L的GGCN最理想,在此濃度下GGCN與吸光度保持良好的線性。
(3)GGT對(duì)測(cè)定的影響:本反應(yīng)利用GGT將雙甘肽與GGCN偶聯(lián),生成黃色的3-羧基-4-硝基苯胺,其加入量可直接影響測(cè)定結(jié)果。GGT高濃度可使底物過(guò)度消耗,使吸光度偏離曲線;低濃度GGT又使吸光度偏低,靈敏度不高。每次加入0.335 U GGT,可獲得理想吸光度與線性。在此濃度下,酶基質(zhì)液的空白管吸光度<0.1A。